Det eksperimentelle arbejde, der danner grundlag for denne ph.d.-afhandling, blev udført på Institut for Medicinsk Biokemi, Aarhus Universitet. Formålet var at undersøge strukturelle og funktionelle aspekter af haptoglobin-hæmoglobin- komplekset og dets receptor CD163 vha. forsøg med CD163- splice- varianter og haptoglobinmutantvarianter udtrykt ved stabil transfektion i mammale celler. Resultaterne af disse undersøgelser præsenteres i tre separate videnskabelige rapporter.
Den første rapport analyserer tre CD163-splice- varianter med forskellige intracellulære haler mht. cellulær distribuering og evne til at mediere endocytose. Det vises, at alle tre CD163-varianter er i stand til at mediere endocytose af haptoglobin-hæmoglobin-komplekset. Mutationel analyse viser endvidere, at evnen til at mediere endocytose afhænger af et motiv på fire aminosyrerester, som findes i alle tre intracellulære haler. CD163-varianterne udviser dog forskellig effektivitet, hvad angår endocytose, hvilket forklares med forskelle i graden af celleoverfladeekspression. Resultaterne er publiceret i tidsskriftet Journal of Leukocyte Biology.
Den anden rapport sammenligner haptoglobin- og haptoglobin-relateret protein (91% identisk med haptoglobin) mht. hæmoglobin- og CD163-bindingsegenskaber. Forskelle i receptoraffinitet indikerer forskellig biologisk rolle af de to haptoglobiner.
Det tredje studium anvender et stort panel af haptoglobin- mutantproteiner til at idenficere et CD163-bindingssted på haptoglobin. Bindingsforsøg viser, at mutation af blot fire haptoglobinaminosyrerester placeret tæt på hinanden i den primære struktur forhindrer højaffinitetsbinding mellem CD163 og haptoglobin-hæmoglobin-komplekset.